华西医学期刊出版社
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找到 关键词 包含"CD133" 8条结果
  • 胃癌CD133阳性细胞的纯化及其生物学特性研究

    目的检测人胃癌KATO-Ⅲ、SGC7901、AGS及MKN-45细胞株中CD133基因及蛋白的表达,研究CD133阳性(CD133+)细胞与CD133阴性(CD133-)细胞的生物学特性的差异。方法采用半定量聚合酶链反应及免疫蛋白印迹法分别检测KATO-Ⅲ、SGC7901、AGS及MKN-45细胞株中CD133基因和蛋白的表达; 免疫磁珠细胞技术将KATO-Ⅲ细胞株中CD133+和CD133-细胞分离纯化,对比两者生长形态特点、体外增殖能力及分化能力的差异; 采用CCK-8法分析CD133+和CD133-细胞对不同浓度(0.05、0.10、0.20、0.50、1.00 mg/ml)化疗药物5氟尿嘧啶(5-FU)敏感性的差别。结果KATO-Ⅲ细胞中CD133基因及蛋白表达量均明显高于SGC7901、AGS及MKN-45细胞(Plt;0.05)。CD133+细胞在无血清培养基中呈球形克隆悬浮生长,相比CD133-细胞具有更强的体外增殖能力及潜在分化能力。5-FU耐药性实验中,CD133+细胞在0.50 mg/ml浓度下的抑制率较CD133-细胞明显降低(Plt;0.05),但其他浓度时二者比较差异无统计学意义(Pgt;0.05)。结论人胃癌细胞株KATO-Ⅲ中的CD133+细胞具有一定增殖、分化及耐药潜能,CD133可作为胃肿瘤起始细胞亚群的表面标志之一。

    发表时间:2016-09-08 10:45 导出 下载 收藏 扫码
  • 胃癌原发灶中上皮间质转化相关因子和CD133的表达及其与临床病理特征和预后的关系△

    目的 研究上皮间质转化(EMT)相关因子Snail、E-cadherin、N-cadherin与胃癌患者临床病理特征、预后及胃癌肿瘤起始细胞表面标志物CD133表达的关系。方法 利用Western blot方法检测50例胃癌及癌旁正常胃黏膜组织中EMT相关因子及CD133蛋白的定位及定量表达,分析EMT相关因子及CD133蛋白表达与胃癌患者的临床病理学指标的关系,Spearman等级相关分析EMT相关因子和CD133表达的关系,Kaplan-Meier方法分析EMT相关因子及CD133表达与胃癌患者生存的关系。结果 ①胃癌组织中Snail、N-cadherin及CD133蛋白表达相对灰度值明显高于其在癌旁正常胃黏膜组织中的表达(Snail:0.599±0.114比0.259±0.108,P=0.020;N-cadherin:0.754±0.154比0.329±0.134,P=0.001;CD133:0.635±0.119比0.485±0.116,P=0.029),E-cadherin蛋白表达相对灰度值明显低于其在癌旁正常胃黏膜组织中的表达(0.378±0.123比0.752±0.156,P=0.003)。②Snail蛋白、N-cadherin蛋白表达平均相对灰度值在有血管浸润、淋巴管浸润、N3淋巴结转移及肿瘤直径≥5 cm和Ⅲ+Ⅳ期胃癌患者中的表达明显高于无血管浸润、淋巴管浸润、N0~N2淋巴结转移及肿瘤直径<5 cm和Ⅰ+Ⅱ期的胃癌患者(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达平均相对灰度值在有血管浸润、淋巴管浸润、N3淋巴结转移及Ⅲ+Ⅳ期胃癌患者中的表达显著低于无血管浸润、淋巴管浸润、N0~N2淋巴结转移及Ⅰ+Ⅱ期的胃癌患者(P<0.05),CD133蛋白表达平均相对灰度值在有淋巴管浸润、N3淋巴结转移、肿瘤直径≥5 cm和Ⅲ+Ⅳ期胃癌患者中的表达显著高于无淋巴管浸润、N0~N2淋巴结转移、肿瘤直径<5cm和Ⅰ+Ⅱ期的胃癌患者(P<0.05)。③Snail、N-cadherin蛋白表达与CD133蛋白表达分别均呈正相关(rs=0.278,P=0.048;rs=0.406,P=0.003),而E-cadherin蛋白表达与CD133蛋白表达呈负相关(rs=-0.504,P=0.000)。④Snail、N-cadherin及CD133蛋白低表达组的生存时间明显长于其高表达者 (P<0.05),联合EMT相关因子和CD133蛋白表达能够最有效预测患者生存。结论 EMT与胃癌肿瘤起始细胞特性之间存在明显相关,并且两者与胃癌的高侵袭的临床病理特征相关,联合EMT相关因子Snail、E-cadherin、N-cadherin与CD133能够最有效预测胃癌患者的预后。

    发表时间:2016-09-08 10:34 导出 下载 收藏 扫码
  • 胃癌组织中CD133 的表达及其临床意义△

    目的 研究胃癌组织中CD133表达的相互关系,重点明确术前、术后外周血单核细胞中CD133 mRNA表达的临床意义及其与胃癌原发灶CD133表达的关系。方法 50例胃癌、10例胃溃疡穿孔及10名健康自愿者入组研究。胃癌患者术前和术后1周抽外周静脉血各4ml,密度梯度离心法分离单核细胞,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测CD133mRNA表达水平。胃溃疡穿孔患者术前抽外周静脉血、健康自愿者抽晨血各4ml。胃癌原发灶及癌旁正常胃黏膜组织分别行RT-PCR、免疫组织化学染色检测CD133mRNA和蛋白的表达。分析CD133表达对各临床病理特征和预后的影响。结果 健康自愿者及术前胃溃疡患者及胃癌患者外周血中CD133mRNA的半定量值分别为0.029±0.060、0.059±0.099及0.270±0.163 (P=0.000)。胃癌患者术前外周血CD133mRNA表达与肿瘤组织分化程度、淋巴管浸润、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均有关(P<0.05)。相关分析显示,胃癌患者术前外周血中CD133mRNA半定量值与淋巴结转移率(rs=0.422,P=0.002)、癌转移淋巴结枚数(rs=0.398,P=0.004)呈正相关,并与胃癌原发灶中CD133mRNA的表达呈正相关(rs=0.337,P=0.017)。胃癌原发灶中CD133蛋白表达阳性者,术前外周血中CD133mRNA的半定量值较CD133蛋白表达阴性者高(Z=-2.539,P=0.011)。50例胃癌患者行胃癌根治术后1周,其外周血中CD133mRNA半定量值明显高于术前CD133mRNA的表达水平(P=0.021)。胃癌浸润深度较深者,术后CD133mRNA表达升高更明显(Z=-1.978,P=0.039)。术后外周血中CD133mRNA高表达者较低表达者预后更差(χ2=6.193,P=0.013)。结论 胃癌患者术前外周血高表达CD133mRNA,其与肿瘤分化程度、淋巴管浸润、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期及胃癌原发病灶CD133蛋白表达有关,且与淋巴结转移率、癌转移淋巴结枚数及胃癌原发灶中CD133mRNA的表达呈正相关。术后患者外周血中CD133mRNA半定量值较术前明显升高,这一升高提示肿瘤浸润程度较深,患者预后较差。

    发表时间:2016-09-08 10:38 导出 下载 收藏 扫码
  • 胃癌组织中CD133蛋白表达及其临床意义

    目的研究胃腺癌组织中CD133蛋白表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学染色方法检测99例胃癌患者手术切除的原发灶及正常胃黏膜组织中CD133蛋白的表达,分析其与临床病理特征和预后的关系。结果29例(29.29%)患者肿瘤组织中CD133蛋白表达阳性,正常胃黏膜组织中均为阴性(P=0.000)。 肿瘤直径gt;5 cm者CD133蛋白表达阳性率显著高于≤5 cm者(P=0.041); CD133蛋白表达与TNM分期有关(P=0.044); 有淋巴结转移(P=0.017)、淋巴管浸润(P=0.000)和血管浸润(P=0.000)者,CD133蛋白表达显著增高。logistic回归分析显示: 肿瘤浸润深度(P=0.011)、淋巴结转移(P=0.043)和TNM分期(P=0.049)分别是CD133蛋白表达阳性的独立危险因素。CD133蛋白表达阳性患者的术后生存时间短于表达阴性患者(P=0.046)。 Cox比例风险回归模型分析显示,有淋巴结转移(P=0.042)、TNM分期(P=0.046)及CD133蛋白表达阳性(P=0.046)分别是胃癌患者预后的独立危险因素。结论胃癌组织中CD133蛋白的表达与胃癌的发展、转移及预后密切相关。

    发表时间:2016-09-08 04:25 导出 下载 收藏 扫码
  • CD44与CD133蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义

    目的研究肿瘤干细胞标志物CD44及CD133蛋白的表达与胃癌临床病理特征和预后的关系。 方法应用免疫组化方法检测100例胃癌组织中CD44和CD133蛋白的表达情况,并对CD133及CD44表达与胃癌患者的临床病理资料和生存率进行统计分析。 结果CD133和CD44蛋白均主要表达在细胞膜,少量在细胞浆中表达。两者的表达均与患者的年龄和性别无关(P>0.05),但与肿瘤的大小、组织学分化程度、血管浸润、淋巴管浸润、淋巴结转移以及pTMN分期有关,肿瘤直径越大(CD44 P=0.015;CD133 P=0.002)、组织学分化程度越差(CD44 P=0.008;CD133 P=0.019)、有血管浸润(CD44 P=0.043;CD133 P=0.023)、有淋巴管浸润(CD44 P=0.020;CD133 P=0.044)、有淋巴结转移(CD44 P=0.002;CD133 P=0.004)、肿瘤浸润越深(CD44 P=0.006;CD133 P=0.021)以及pTNM分期越高(CD44 P=0.034;CD133 P=0.001),其CD44和CD133蛋白的表达阳性率越高。CD44+CD133+双阳性表达与患者的年龄、性别、肿瘤的组织学分化程度以及血管浸润均无关(P>0.05),但与肿瘤大小、淋巴管浸润、肿瘤T分期、N分期以及pTNM分期有关,其中,肿瘤直径越大(P=0.010)、有淋巴管浸润(P=0.003)、有淋巴结转移(P=0.045)、肿瘤浸润越深(P=0.041)以及pTNM分期越高(P=0.049),其CD44+CD133+双阳性表达率越高。单因素生存分析结果显示,淋巴结转移(P<0.001)、TNM分期(P=0.013)、CD44蛋白阳性表达(P=0.005)、CD133蛋白阳性表达(P=0.002)以及CD44+CD133+双阳性表达(P<0.001)和患者的3年生存率均有关。Spearman等级相关分析结果表明,CD44蛋白的表达与CD133蛋白的表达呈正相关(r=0.207,P=0.039)。logistic回归分析提示CD44+CD133+蛋白双阳性表达是淋巴结转移(P=0.038)的独立危险因素。Cox风险回归多因素生存分析显示,淋巴结转移(P=0.006)以及CD44和CD133蛋白的共表达(P=0.003)是影响胃癌患者术后生存的独立预后因素。 结论CD44和CD133可作为胃癌干细胞的肿瘤标志物;CD44与CD133蛋白的共表达是影响胃癌患者预后的独立危险因素,与患者预后密切相关,其表达水平越高,预后越差。

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  • 胆囊癌CD133阳性细胞侵袭机制的实验研究

    目的研究胆囊癌CD133阳性细胞侵袭能力的产生机制。 方法Transwell法检测CD133阳性细胞和CD133阴性细胞的迁移和侵袭能力。半定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法、蛋白免疫印迹法、细胞免疫荧光法分别检测CD133阳性细胞和CD133阴性细胞中CXCR4的表达。分别用SDF-1α、AMD3100作用GBC-SD细胞后,Transwell法检测CD133阳性细胞和CD133阴性细胞的迁移和侵袭能力。半定量RT-PCR法检测GBC-SD细胞中CD133 mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测GBC-SD细胞中CD133蛋白表达。 结果①CD133阳性细胞中穿膜细胞数明显多于CD133阴性细胞(23.78±8.74比6.56±3.09,P=0.000 7)。②CD133阳性细胞中CXCR4mRNA相对灰度值明显高于CD133阴性细胞(0.642 4±0.020 4比0.335 9±0.043 2,P=0.004);CD133阳性细胞中CXCR4蛋白表达相对灰度值明显高于CD133阴性细胞(0.765 0±0.106 6比0.409 4±0.019 5,P=0.013);CD133阳性细胞中CXCR4荧光蛋白表达明显强于CD133阴性细胞。③细胞侵袭能力:穿膜细胞数量在CD133阳性细胞中,与空白对照组(23.78±8.74)相比,SDF-1α组(62.89±15.27)明显增加(P=0.000 6),AMD3100组(10.33±2.00)明显减少(P=0.000 2);在CD133阴性细胞中,与空白对照组(6.59±3.09)相比,SDF-1α组(6.89±4.23)无明显变化(P=0.41),AMD3100组(6.11±2.67)亦无明显变化(P=0.38)。④细胞迁移能力:迁移细胞数量,在CD133阳性细胞中,与空白对照组(35.56±10.97)相比,SDF-1α组(74.56±15.80)明显增加(P=0.000 3),AMD3100组(12.67±2.40)明显减少(P=0.000 2);在CD133阴性细胞中,与空白对照组(9.56±1.74)相比,SDF-1α组(9.78±2.04)无明显变化(P=0.43),AMD3100组(9.54±1.74)亦无明显变化(P=0.42)。⑤在GBC-SD细胞中CD133 mRNA表达:与空白对照组(0.450 0±0.024 3)相比,SDF-1α组明显增加(0.626 5±0.048 7,P=0.004),AMD3100组(0.359 3±0.047 3)明显下降(P=0.011);CD133蛋白表达:与空白对照组(0.440 9±0.013 0)相比,SDF-1α组(0.508 9±0.020 7)明显增加(P=0.016),而AMD3100组(0.317 7±0.013 7)明显下降(P=0.004)。 结论胆囊癌CD133阳性细胞高侵袭能力可能由于高表达CXCR4。

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  • HOTAIR在CD133阳性胃癌细胞中的表达及其作用研究

    目的研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)中的同源基因转录反义基因间RNA(HOTAIR)在人胃癌KATO-Ⅲ细胞中的表达及其作用。 方法采用免疫磁珠分选技术分选出人胃癌KATO-Ⅲ细胞中的CD133阳性和CD133阴性细胞后,再采用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chainreaction,RT-PCR)法检测其中HOTAIR mRNA和CD133 mRNA的表达水平;采用小干扰RNA技术(small inter-fering RNA,siRNA)干扰CD133阳性细胞中HOTAIR的表达后,再采用RT-PCR法检测细胞中HOTAIR mRNA的表达水平,以筛选出干扰效果最好的siRNA用于后续实验;以筛选出的siRNA干扰序列干扰CD133阳性细胞中HOTAIR的表达后,检测细胞中CD133 mRNA、E-钙黏素(E-cadherin)mRNA及N-钙黏素(N-cadherin)mRNA的表达,并开展Transwell实验以检测细胞迁移和侵袭能力的改变。 结果①RT-PCR检测结果表明,CD133阳性组细胞中CD133 mRNA和HOTAIR mRNA的表达水平均高于CD133阴性组和未分选组(P<0.05)。②siHOTAIR干扰细胞中HOTAIR的表达后,siHOTAIR1组、siHOTAIR2组及siHOTAIR3组细胞中HOTAIR mRNA的表达水平均低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05),且siHOAIR2组细胞中HOTAIR mRNA的表达水平低于siHOTAIR1组及siHOTAIR3组(P<0.05),表明siHOTAIR2的干扰效果最好。③siHOTAIR2组细胞中CD133 mRNA和N-cadherin mRNA的表达水平均低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05),但E-cadherin mRNA的表达水平却高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);细胞迁移实验和侵袭实验结果均表明,siHOTAIR2组的穿膜细胞数均低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05)。 结论HOTAIR mRNA在CD133阳性人胃癌KATO-Ⅲ细胞中的表达水平高于CD133阴性细胞,干扰HOTAIR mRNA的表达可下调CD133阳性人胃癌KATO-Ⅲ细胞中CD133 mRNA的表达,并抑制胃癌细胞的迁移及侵袭。

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  • CD133在胃癌组织中的表达及其临床意义的系统评价

    目的系统评价CD133蛋白表达与胃癌及其临床病理特征的相关性。 方法计算机检索PubMed、EMbase、Web of Knowledge、The Cochrane Library(2013年第10期)、CBM、VIP(1989~2013.10)、CNKI及WanFangData,查找国内外公开发表的关于CD133蛋白表达与胃癌及其临床病理特征相关性的病例-对照研究,检索时限均为从建库至2013年10月。由两位研究者按照纳入和排除标准筛选文献、提取资料并评价质量后,采用RevMan 5.2软件进行Meta分析。 结果最终纳入9个病例-对照研究,共623例患者。Meta分析结果显示:CD133蛋白在胃癌组与癌旁和正常胃组织组[OR=3.89,95% CI(1.87, 8.11),P=0.000 3]、淋巴结转移组与无淋巴结转移组[OR=2.75,95% CI(1.99, 3.81),P<0.000 01]、胃癌Ⅲ~Ⅳ期组与Ⅰ~Ⅱ期组[OR=2.83,95% CI(2.13, 3.76),P<0.000 01]、伴远处转移组与无远处转移组[OR=2.38,95% CI(1.47, 3.85),P=0.000 4]的表达差异均有统计学意义。但在高中分化组与低分化组的表达差异无统计学意义[OR=1.70,95% CI(0.90, 3.21),P=0.10]。 结论CD133蛋白的表达与胃癌患病及其淋巴结转移、远处转移及临床分期等有明显相关性,提示其在胃癌发生、发展过程中可能起重要作用。受纳入研究质量限制,上述结论尚需更多大样本、设计严谨的高质量研究加以验证。 目的系统评价CD133蛋白表达与胃癌及其临床病理特征的相关性。 方法计算机检索PubMed、EMbase、Web of Knowledge、The Cochrane Library(2013年第10期)、CBM、VIP(1989~2013.10)、CNKI及WanFangData,查找国内外公开发表的关于CD133蛋白表达与胃癌及其临床病理特征相关性的病例-对照研究,检索时限均为从建库至2013年10月。由两位研究者按照纳入和排除标准筛选文献、提取资料并评价质量后,采用RevMan 5.2软件进行Meta分析。 结果最终纳入9个病例-对照研究,共623例患者。Meta分析结果显示:CD133蛋白在胃癌组与癌旁和正常胃组织组[OR=3.89,95% CI(1.87, 8.11),P=0.000 3]、淋巴结转移组与无淋巴结转移组[OR=2.75,95% CI(1.99, 3.81),P<0.000 01]、胃癌Ⅲ~Ⅳ期组与Ⅰ~Ⅱ期组[OR=2.83,95% CI(2.13, 3.76),P<0.000 01]、伴远处转移组与无远处转移组[OR=2.38,95% CI(1.47, 3.85),P=0.000 4]的表达差异均有统计学意义。但在高中分化组与低分化组的表达差异无统计学意义[OR=1.70,95% CI(0.90, 3.21),P=0.10]。 结论CD133蛋白的表达与胃癌患病及其淋巴结转移、远处转移及临床分期等有明显相关性,提示其在胃癌发生、发展过程中可能起重要作用。受纳入研究质量限制,上述结论尚需更多大样本、设计严谨的高质量研究加以验证。

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